Hyaluronidase, Bovine testes  (Synonyms: 玻璃酸酶; Hyaluronate 4-glycanohydrolase, Bovine testes; Hyaluronoglucosaminidase, Bovine testes)

Hyaluronidase, Bovine testes (Hyaluronate 4-glycanohydrolase; Hyaluronoglucosaminidase) is an endoglycosidase that depolymerizes Hyaluronic acid (HA) (HY-B0633A) by cleavage of glycosidic bonds. Hyaluronidase degrades HA and activates membrane receptors that trigger pathways converging in NF-κB activation. Hyaluronidase is employed in the research of granulomatous foreign body reactions, soft-tissue necrosis caused by vascular compromise and uncomplicated nodules, overcorrection, inflamed nodules or tissue ischemia associated with HA filler injection^{[1][2][3][4][5][6]}.

1. Hyaluronidase 抑制试验^[3]
(1) 将 10 μL 8 mg/mL Hyaluronidase 在缓冲溶液 (0.1 M 乙酸盐缓冲液, pH 3.6) 中与样品混合加入试管，并在 37 °C 下孵育 20 分钟。
(2) 将 20 μL 12.5 mM 氯化钙加入混合物中，并在 37 °C 下再孵育 20 分钟。
(3) 用缓冲液中的 50 μL 2.4 μg/mL 透明质酸处理活化的 Ca²⁺ 混合物，并在 37 °C 下进一步孵育 40 分钟。
(4) 加入 2 μL 0.4 N 氢氧化钠和 20 μL 0.4 N 四硼酸钾四水合物，然后在 100 °C 下水浴孵育 3 分钟。
(5) 冷却至室温后，向混合物中加入 600 μL DMAB 溶液，并在 37 °C 下孵育 20 分钟。
(6) 使用酶标仪在 585 nm 处测量吸光度。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

1. Hyaluronidase 对 HA 诱导的血管并发症中皮肤坏死的影响^[7]
(1) 使用 10 只体重 3-4 kg 的兔子，通过肌肉注射 ketamine (50 mg/kg) 和 xylazine (10 mg/kg) 对兔子进行麻醉。
(2) 剃去耳朵上的毛发，通过电凝术凝固耳后的血管后支。用 1% lidocaine (HY-B0185) 浸润耳朵近端皮肤，并切开皮肤以暴露后耳动脉的前支。
(3) 在手术显微镜下用 30 号针头穿刺动脉，并注射 0.25 mL HA 填充剂。最初注入动脉的少量 HA 填充剂可以扩张动脉腔，有助于针头在动脉内的定位。
(4) 将 HA 填充剂注射到双耳，其中一只耳朵皮下注射 750 IU Hyaluronidase。5 只兔子 (4 h 干预组) 在 HA 注射后 4 h 注射Hyaluronidase，另外 5 只兔子 (24 h 干预组) 在 HA 注射 24 h 后注射 Hyaluronidase。
(5) 拍摄皮肤变化的进展情况，并测量最终坏死区域。使用 Statistical Package for Social Sciences (SPSS) 软件进行统计分析。
2. Hyaluronidase 对基于纳米颗粒的抗肿瘤活性的影响^[8]
(1) 本实验采用雌性 Balb/c 小鼠。将 4T1 细胞悬浮于 PBS 中，密度为 1×10⁶/50 μL，分别注射于小鼠单侧或双侧后部皮下。
(2) 当肿瘤体积达到 110-150 mm³ 时进行体内实验。将小鼠随机分为 4 组 (n=5)：生理盐水注射组、Hyaluronidase 注射组、NM-Ce6 诱导 PDT 组、Hyaluronidase + NM-Ce6 诱导 PDT 组。Hyaluronidase 注射组：将 1500 U Hyaluronidase 溶于 50 µL PBS 中，注射至每个肿瘤内。注射 Hyaluronidase 1 小时后，每只小鼠静脉注射 200 µL NM-Ce6，Ce6 浓度为 1 mg/mL (Ce6 剂量=10 mg/kg)。注射 NM-Ce6 24 小时后，以 2 mW/cm² 的功率密度，将肿瘤暴露于 660 nm 光中 60 分钟，进行 PDT。
(3) 在初次治疗后的第 6 天再次重复相同的程序。记录肿瘤体积和小鼠体重，持续 12 天。治疗后，取出每组 4 个肿瘤并称重，取出每组的主要器官进行 H&E 染色。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

55000 (average)

37326-33-3

固体

Off-white to light yellow

玻璃酸酶； 透明质酸酶

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